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十八烷基硅烷鍵合硅膠柱硅膠層析時(shí)如何裝柱News
十八烷基硅烷鍵合硅膠柱硅膠層析時(shí)如何裝柱
更新時(shí)間:2017-12-23 點(diǎn)擊次數(shù):6326次
   十八烷基硅烷鍵合硅膠柱利用吸附原理,即利用硅膠對(duì)中藥混合物中各種成分吸附能力的差異,而使混合物中各成分得以分離的色譜方法。
  十八烷基硅烷鍵合硅膠柱層析操作裝柱的方法:
  裝柱前柱底要墊一層脫脂棉以防吸附劑外漏。具體有干法裝柱和濕法裝柱兩種方法:
  1.干法裝柱:將硅膠通過漏斗裝入柱內(nèi),中間不應(yīng)間斷,形成一細(xì)流慢慢加入管內(nèi)。也可用橡皮槌輕輕敲打柱硅膠柱使硅膠裝填連續(xù)均勻、緊密。柱裝好后,打開下端活塞,然后倒入洗脫劑洗脫以排盡柱內(nèi)空氣,并保持一定液面。
  2.濕法裝柱:將zui初準(zhǔn)備使用的洗脫劑裝入柱內(nèi),打開下端活塞,使洗脫劑緩慢流出。然后把硅膠慢慢連續(xù)不斷地倒入柱內(nèi)(或?qū)⒐枘z與適量洗脫劑調(diào)成混懸液慢慢加入柱內(nèi)),硅膠依靠重力和洗脫劑的帶動(dòng),在柱內(nèi)自由沉降,此間要不斷把流出的洗脫劑加回柱內(nèi)保持一定的液面,直至把硅膠加完并在柱內(nèi)沉降不再變動(dòng)為止。然后在硅膠上面加一小片濾紙或少許脫脂棉。根據(jù)加樣量控制洗脫劑液面至一定高度。
  注意:
  1.柱色譜分離能力比薄層分離能力強(qiáng),效果更好,尤其對(duì)結(jié)構(gòu)相似、性質(zhì)接近、采用薄層難以分離的成分分離效果好。
  2.洗柱子能不用含水的混合溶劑,就盡量不要用。

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